一文與您分享液相色譜儀的分離過程

　　液相色譜儀既能用于微量組分的分析測定，又能用于大量的制備分離，靈活多樣，其應用范圍已超過其他各種分離方法，尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發揮它的特長，為推動該領域的進步和發展作出了巨大貢獻。所謂柱壓穩定并不是指壓力值穩定于一個恒定值而是指壓力波動范圍在50PSI(3.3Bar)之間(在使用梯度洗脫時，柱壓平穩緩慢的變化是允許的)，壓力過高、過低都屬于柱壓問題。

 

　　液相色譜儀的分離過程：

 

　　同其他色譜過程一樣，HPLC也是溶質在固定相和流動相之間進行的一種連續多次交換過程。它借溶質在兩相間分配系數、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質得以分離。

 

　　開始樣品加在柱頭上，假設樣品中含有3個組分，A、B和C，隨流動相一起進入色譜柱，開始在固定相和流動相之間進行分配。分配系數小的組分A不易被固定相阻留，較早地流出其色譜柱。分配系數大的組分C在固定相上滯留時間長，較晚流出其色譜柱。組分B的分配系數介于A，C之間，另一個流出其色譜柱。若一個含有多個組分的混合物進入系統，則混合物中各組分按其在兩相間分配系數的不同先后流出其色譜柱，達到分離之目的。

 

　　不同組分在色譜過程中的分離情況，首先取決于各組分在兩相間的分配系數、吸附能力、親和力等是否有差異，這是熱力學平衡問題，也是分離的條件。

 

　　其次，當不同組分在色譜柱中運動時，譜帶隨柱長展寬，分離情況與兩相之間的擴散系數、固定相粒度的大小、柱的填充情況以及流動相的流速等有關。所以分離較終效果則是熱力學與動力學兩方面的綜合效益。