海能儀器：豬和牛脂肪中孕酮殘留量的測定（液相色譜法）

醋酸美侖孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮為合成的孕激素類藥物，有明顯的孕激素和抗雄激素作用，可抑制排卵。孕激素對垂體促性腺激素的釋放有一定的抑制作用，動物實驗表明有死胎率增加和致畸作用，副作用有：（１）惡心、頭暈、倦怠；（２）突破性出血；（３）孕期服用，會增加女性后代的男性化作用。孕激素類藥物能增強體內物質沉積和改善生產性能，可以很快產生顯著和直接的經濟效益，因此，對生產者有很大的吸引力。畜牧業中使用孕激素類藥物（非治療用途）已有很長的歷史，但人類長期食用含有激素的肉制食品，即使含量甚微，亦會明顯影響機體的激素平衡，而且有致癌危險，對幼兒造成發育異常等危害。因此，開發一種能檢測孕酮殘留量的方法是十分必要的。本文采用液相色譜法對牛和豬脂肪樣品中的孕酮進行檢測.

1　試劑與儀器

1．1　試劑　醋酸美侖孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮標準品，乙腈，甲醇，乙酸乙酯，其他試劑為分析純。水由凈化系統制得。

　　（１）標準儲備液：１０００μｇ／ｍｌ，分別準確稱取0.05ｇ 醋酸美侖孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮標準品于５０ｍｌ容量瓶中，用甲醇定容。于４℃保存，可使用一年。

　　（２）混合中間溶液Ｉ：１００μｇ／ｍｌ，分別吸取10.0ｍｌ 醋酸美侖孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮標準儲備液于１００ｍｌ 容量瓶中，用甲醇定容。于４℃保存，可使用一年。

　　（３）混合中間溶液ＩＩ：１．０μｇ／ｍｌ，取１．００ｍｌ 混合中間溶液Ｉ于１００ｍｌ 容量瓶中，用甲醇定容。于４℃保存，可使用半年。

（４）混合標準工作液：分別吸取１０、２０、４０、８０、１００μｌ 混合中間溶液ＩＩ 添加到９８０、９７０、９５０、９１０、８９０μｌ 的乙腈－水（６５：３５）中，再加入１０μｌ ０．２％鹽酸溶液，混勻，得到濃度為０．０１０μｇ／ｍｌ、０．０２０μｇ／ｍｌ、０．０４０μｇ／ｍｌ、０．０８０μｇ／ｍｌ 和０．１０μｇ／ｍｌ 混合標準工作液，供液相色譜測定，當日使用。

1．2　儀器　LC7000 液相色譜系統，LC7011泵體，LC7020 紫外－可見檢測器，Hanon-Clarity色譜軟件。氮吹儀；海能全自動固相萃取裝置；低溫離心機；渦旋混勻器；ＣＮ 固相萃取柱。