食品與飼料國(guó)標(biāo)對(duì)比，凱氏定氮儀測(cè)定寵物食品揮發(fā)性鹽基氮含量

揮發(fā)性鹽基氮是評(píng)價(jià)寵物食品新鮮度與衛(wèi)生安全的核心指標(biāo)，其含量直接反映蛋白質(zhì)類原料在加工、儲(chǔ)存過(guò)程中因微生物或酶解作用產(chǎn)生的腐敗產(chǎn)物（如氨、三甲胺等）。通過(guò)凱氏定氮儀測(cè)定揮發(fā)性鹽基氮含量，可精準(zhǔn)量化此類有害物質(zhì)，為質(zhì)量管控提供科學(xué)依據(jù)。

本方案分別參照《GB 5009.228-2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定》和《GB/T32141-2015 飼料中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定》兩種國(guó)標(biāo)，使用海能K1160全自動(dòng)凱氏定氮儀測(cè)定寵物食品中的揮發(fā)性鹽基氮含量。通過(guò)雙國(guó)標(biāo)對(duì)比測(cè)試，揭示國(guó)標(biāo)方法差異對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響，從方法學(xué)層面為企業(yè)構(gòu)建差異化的質(zhì)控策略提供科學(xué)依據(jù)。

海能K1160全自動(dòng)凱氏定氮儀、分析天平等。

甲基紅、溴甲酚綠、硼酸、氫氧化鈉、無(wú)水硫酸鉀、五水合硫酸銅、濃硫酸、氧化鎂、高氯酸。

凍干鱈魚粒、凍干蛋黃粒和魚粉、貓糧。

（1）食品國(guó)標(biāo)：

稱取10 g（精確至 0.1 mg）的樣品于100 mL離心管中，加入75 mL的純水，振搖，使試樣在樣液中分散均勻，浸漬30min。隨后，將浸漬完成后的樣品進(jìn)行離心(3500r/min，5min)，取10 mL，離心后的上清液轉(zhuǎn)移并至干凈的消化管中待測(cè)。

（2）飼料國(guó)標(biāo)：

稱取5 g（精確至 0.1 mg）的樣品于錐形瓶中，加入高氯酸溶液40 mL，振搖30min，將試樣及試樣浸提液完全轉(zhuǎn)移至 50mL容量瓶中，并使用高氯酸溶液定容，搖勻；取 30 mL試樣浸提液于 50mL 離心管中，離心（3500r/min，5min），取10 mL離心后的上清液轉(zhuǎn)移并至干凈的消化管中待測(cè)。

（1）食品國(guó)標(biāo)：

將盛有樣品濾液的消化管加入1 g氧化鎂后，立即放置于凱氏定氮儀上進(jìn)行檢測(cè)，定氮儀參數(shù)設(shè)置如表1：

表1  K1160全自動(dòng)凱氏定氮儀試驗(yàn)參數(shù)設(shè)置

（2）飼料國(guó)標(biāo)：

將盛有樣品濾液的消化管放置于凱氏定氮儀上進(jìn)行檢測(cè)，定氮儀參數(shù)設(shè)置如表2：

表2  K1160全自動(dòng)凱氏定氮儀試驗(yàn)參數(shù)設(shè)置

注：表中氫氧化鈉溶液的濃度為40g/L。

經(jīng)上機(jī)測(cè)試，使用食品和飼料國(guó)標(biāo)測(cè)得樣品中的揮發(fā)性鹽基氮含量如表3所示：

表3  樣品揮發(fā)性鹽基氮含量表

為進(jìn)一步驗(yàn)證兩種國(guó)標(biāo)測(cè)試結(jié)果差異的原因所在，選用同一種貓糧樣品，通過(guò)單因素（控制加堿種類作為唯一變量）實(shí)驗(yàn)進(jìn)行探究，具體測(cè)試結(jié)果如表4：

表4  貓糧樣品的揮發(fā)性鹽基氮含量表

注：實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算過(guò)程中（根據(jù)10 mL濾液的滴定體積進(jìn)行反推，進(jìn)而得到全部樣品的揮發(fā)性鹽基氮含量），食品國(guó)標(biāo)方法中所乘的稀釋倍數(shù)為7.5，飼料國(guó)標(biāo)所乘稀釋倍數(shù)則為5。

（1）食品國(guó)標(biāo)中，樣品浸提完畢后，通過(guò)離心取部分濾液的方式，可有效改善樣品蒸餾過(guò)程的沸騰上沖問(wèn)題。另外，相較于取全部濾液，取部分濾液的方式測(cè)試結(jié)果更準(zhǔn)確（全部濾液移取過(guò)程，會(huì)有部分濾液無(wú)法移出）。

（2）飼料國(guó)標(biāo)中規(guī)定的氫氧化鈉溶液濃度為40 g/L，建議測(cè)試前需提前準(zhǔn)備好相應(yīng)濃度的氫氧化鈉溶液。氫氧化鈉濃度不同也會(huì)影響揮發(fā)性鹽基氮含量的測(cè)試結(jié)果，氫氧化鈉濃度為400 g/L時(shí)，會(huì)導(dǎo)致測(cè)試結(jié)果顯著高于40 g/L氫氧化鈉溶液。

1、表3測(cè)試結(jié)果表明，凱氏定氮儀能夠有效測(cè)定寵物食品中揮發(fā)性鹽基氮的含量，測(cè)試精度均符合《GB 5009.228-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定》和《GB/T 32141-2015 飼料中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定》國(guó)標(biāo)的要求。

2、表4驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在兩種標(biāo)準(zhǔn)下，使用氫氧化鈉的測(cè)定結(jié)果相近，使用MgO的測(cè)定結(jié)果也相近。另外，相同樣品在相同標(biāo)準(zhǔn)下，堿種類不同會(huì)導(dǎo)致?lián)]發(fā)性鹽基氮測(cè)定值存在顯著差異，其中氫氧化鈉的測(cè)定值顯著高于MgO。

綜上，通過(guò)使用《GB 5009.228-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定》和《GB/T 32141-2015 飼料中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定》兩種國(guó)標(biāo)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，相同樣品下，飼料國(guó)標(biāo)測(cè)試結(jié)果高于食品國(guó)標(biāo)。這可能是因?yàn)橄啾扔谑称穱?guó)標(biāo)中加入的MgO，飼料國(guó)標(biāo)加入的氫氧化鈉其堿性更強(qiáng)可能會(huì)導(dǎo)致部分含氮有機(jī)物過(guò)度水解或破壞進(jìn)而導(dǎo)致測(cè)試結(jié)果高于食品國(guó)標(biāo)，兩種國(guó)標(biāo)方法的不同進(jìn)而導(dǎo)致測(cè)試結(jié)果的不同。

參考標(biāo)準(zhǔn)

【1】《GB 5009.228-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定》

【2】《GB/T 32141-2015 飼料中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定》